分光光度法目前只能测有颜色或具有吸光度的水质样品。如果所分析水样没有颜色或者吸光值非常小,那就需要水质分析人员在被测样品中加入能与被测物质生成稳定,且具有颜色物质的反应试剂。而这个过程被称为显色反应,这种试剂被称之为显色剂。另外显色反应在分析时与显色剂有关,而且与显色的条件有关。 在水质分析时选择显色反应条件,主要目的是为了让待测成分在选择的反应条件下,能有效地转变为适于光度分析的化合物。为了提高分析的灵敏度和准确度,必须选择合适的显色剂用量、溶液酸度、显色时间和温度等。 分光光度法的显色反应条件 1、显色剂的用量 在显色反应中一般都加入适当过量的显色剂,以使被测物质尽可能转化为有色化合物,但并非显色剂加得越多越好,显色剂过多,则会发生其他副反应,对水质的分析不利。在实际工作中应该根据实验要求常严格控制显色剂的用量。 2、显色溶液的酸度 有机显色剂大部分是有机弱酸,溶液的酸度影响显色剂的浓度以及本身的颜色。由于大部分金属离子容易水解,酸度也会影响金属离子的存在状态,进一步还会影响有色化合物的组成和稳定性。因此,应通过试验确定出适当的酸度范围,并在水质分析过程中严格控制。 3、显色反应时间 有些显色反应能够迅速完成且颜色稳定;有些显色反应速率较慢,需放置一段时间,颜色才能稳定。因此,应该在显色反应完成后,颜色达到最大深度(即吸光度最大)且稳定的时间范围内进行分析。 4、显色温度 一般情况下,显色反应多在室温下进行,但有些显色反应需加热到一定温度才能完成。因此,不同的显色反应应选择适宜的显色温度,并应注意控制温度。 5、溶剂 溶剂的不同可能会影响显色时间、有色化合物的离解度和颜色等。在分析时标准溶液和被测溶液应采用同一种溶剂。
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